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浙江吉諾生命健康控股集團有限公司

HE/IHC/IF/TUNEL等組織染色

2024-10-29 18:09 來源:heyunlong 點擊:31

1. HE染色:

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材料:石蠟切片

染料:蘇木精染液為堿性,主要使細胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍色;伊紅為酸性染料,主要使細胞質(zhì)和細胞外基質(zhì)中的成分著紅色。

應(yīng)用:一般的組織變化和組織產(chǎn)物都可以通過這一染色法顯示出來,是形態(tài)學最常用的染色方法。

結(jié)果:細胞核被蘇木精染成鮮明的藍色,軟骨基質(zhì)、鈣鹽顆粒呈深藍色,粘液呈灰藍色。細胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色,胞漿內(nèi)嗜酸性顆粒呈反光強的鮮紅色。膠原纖維呈淡粉紅色,彈力纖維呈亮粉紅色,紅血球呈橘紅色,蛋白性液體呈粉紅色。


2. 甲苯胺藍染色:

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材料:石蠟切片,細胞爬片

染料:甲苯胺藍,人工合成的堿性染料,組織細胞中酸性物質(zhì)與其中陽離子相結(jié)合而被染色

應(yīng)用:尖銳濕疣的初篩及肥大細胞的檢測,細胞內(nèi)酸性黏液多糖染色,神經(jīng)細胞尼氏小體染色

結(jié)果:可染細胞核呈藍色,肥大細胞胞質(zhì)內(nèi)肝素和組織胺等異色性物質(zhì)可呈易染性紫紅色,軟骨、成骨細胞呈紫紅色,酸性黏多糖呈紅色,尼氏小體呈深藍色。


3. 天狼星紅苦味酸染色

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材料:4%甲醛固定組織石蠟切片

染料:天狼星紅-飽和苦味酸液

應(yīng)用:利用膠原蛋白聚合及其纏繞螺旋排列不同的特點,該染色法可在偏振光顯微鏡下,根據(jù)雙折光性和著色的不同,分別顯示出四型膠原纖維。

結(jié)果:普通光鏡:膠原纖維呈紅色,細胞核呈綠色,其他成分呈黃色。

         偏振光顯微鏡:Ⅰ型膠原纖維:紅色或黃色,排列緊密,具強雙折光性;

         Ⅱ型膠原纖維:多種色彩,疏松網(wǎng)狀、弱雙折光性;

         Ⅲ型膠原纖維:綠色,細纖維、弱雙折光性;

         Ⅳ型膠原纖維:淡黃色、弱雙折光性。


4. TUNEL染色

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材料:石蠟包埋、冰凍和超薄切片,細胞

染料:熒光素標記的dUTP在脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶(TdT酶)的作用下,可以連接到凋亡細胞中斷裂DNA的3’-OH末端,并與連接辣根過氧化物酶(HRP)的熒光素抗體特異性結(jié)合,后者又與HRP底物二氨基聯(lián)苯胺(DAB)反應(yīng)產(chǎn)生很強的顏色反應(yīng)。

應(yīng)用與結(jié)果:單細胞水平上的凋亡原位檢測,抗腫瘤藥的藥效評價及通過雙色法確定細胞死亡類型和分化階段。凋亡細胞核染色呈深棕色,正常或正在增殖細胞不被染色。


5. 免疫染色

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包括免疫組織化學(IHC)/免疫細胞化學(ICC)和免疫熒光(IF),均是通過可視化抗原抗體結(jié)合反應(yīng),對組織細胞內(nèi)抗原(多肽和蛋白質(zhì))定性、定位和相對定量的研究。IHC和ICC使用的顯色劑多為酶,即化學顯色;IF使用的顯色劑多為熒光素,即熒光顯色。


材料:細胞、冰凍切片、石蠟切片

應(yīng)用與結(jié)果:惡性腫瘤的診斷與鑒別診斷,轉(zhuǎn)移性惡性腫瘤的原發(fā)部位確認,腫瘤的病理分型,微小轉(zhuǎn)移灶確認,陽性產(chǎn)物定位、相對定量,細胞凋亡檢測。