Dulbecco's 改良培養(yǎng)基DMEM(Dulbecco's Modified Eagle Medium)是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上研制的,與MEM培養(yǎng)基相比,氨基酸的含量增加了2倍,維生素的含量增加了4倍,同時(shí)還增加了非必須氨基酸、微量鐵離子以及丙酮酸鈉。DMEM培養(yǎng)基最初設(shè)計(jì)葡萄糖含量為1000mg/L(低糖型),后來又發(fā)展出葡萄糖含量為4500mg/L(高糖型),現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于各種細(xì)胞的培養(yǎng)。
多聚-L-賴氨酸 (Poly-L-Lysine,PLL)是由賴氨酸單體聚合而成的多聚陽離子,有左旋和右旋兩種同分異構(gòu),常用左旋的,即PLL。相對分子量為70,000~300,000的PLL可作為細(xì)胞培養(yǎng)的生長基質(zhì),能夠促進(jìn)細(xì)胞粘附和貼壁,是細(xì)胞培養(yǎng)中常用的細(xì)胞粘附劑。多聚-L-賴氨酸 (PLL)一般常見的分子量有70,000~150,000、150,000~300,000和>300,000,分子量越大,黏附力越強(qiáng),但相對完全溶解較困難,細(xì)胞培養(yǎng)中一般常用分子量150,000~300,000的多聚-L-賴氨酸。
使用說明(細(xì)胞培養(yǎng))
1、稀釋:用無菌純化水或PBS溶液9:1稀釋該多聚-L-賴氨酸溶液至工作濃度(0.1mg/mL),稀釋的多聚-L-賴氨酸溶液在2℃~8℃中保存至少3個(gè)月有效。
2、包被:將工作濃度的多聚-L-賴氨酸溶液加入培養(yǎng)器皿,加入的量視器皿大小而定,一般而言,能夠潤濕或覆蓋住培養(yǎng)皿的生長面即可,37℃靜置2h~4h或室溫下靜置過夜,無菌操作。
3、洗滌:去除多聚賴氨酸,用無菌純化水或PBS溶液洗滌培養(yǎng)皿數(shù)次,超凈臺無菌風(fēng)干后使用。
4、接種細(xì)胞前用培養(yǎng)液洗滌培養(yǎng)皿1次,然后將細(xì)胞接種至包被好培養(yǎng)皿中。
5、次日鏡下觀察細(xì)胞的生長狀態(tài)。
注意事項(xiàng)
1、本產(chǎn)品經(jīng)過濾除菌,使用本產(chǎn)品時(shí)應(yīng)注意無菌操作,避免污染。
2、使用后的多聚-L-賴氨酸溶液若出現(xiàn)渾濁或污染要丟棄。
3、本產(chǎn)品僅用于科研或進(jìn)一步研究使用,不用于診斷和治療。