將Transwell小室放入培養(yǎng)板中,小室內(nèi)稱上室,培養(yǎng)板內(nèi)稱下室,上室內(nèi)盛裝上層培養(yǎng)液,下室內(nèi)盛裝下層培養(yǎng)液,上下層培養(yǎng)液以聚碳酸酯膜相隔。將細(xì)胞種在上室內(nèi),由于聚碳酸酯膜有通透性,下層培養(yǎng)液中的成分可以影響到上室內(nèi)的細(xì)胞,從而可以研究下層培養(yǎng)液中的成分對(duì)細(xì)胞遷移運(yùn)動(dòng)等的影響。
實(shí)驗(yàn)步驟:
1. 37℃溫育細(xì)胞培養(yǎng)試劑和Transwell
2. 收集對(duì)數(shù)期細(xì)胞,懸浮細(xì)胞,計(jì)數(shù)
3. 下室加含血清培養(yǎng)液,上室加細(xì)胞懸液培養(yǎng)
4. 甲醇固定
5. 結(jié)晶紫染色
6. 中性樹脂封片
7. 統(tǒng)計(jì)結(jié)果
結(jié)果案例: